fa مقایسه میزان تولید پروتئین نوترکیب در دو رده سلولی CHO و MCF7 پژوهشي اصیل Original Research <div align="right" style="direction: rtl"> مقدمه: هدف ازمطالعه‌ی حاضر، مشخص نمودن رده سلولی مناسب‌تر، جهت مطالعات تولید پروتئین در سیستم‌های یوکاریوتی می‌باشد. پس از ترانسفکشن، تغییرات ایجاد شده در سطوح بیانیRNA و پروتئین نوترکیب هدف ارزیابی شد. مواد و روش‌ها: به منظور بررسی بیان ژن مورد نظر و تولید پروتئین نوترکیب E6 پاپیلوما ویروس انسانی تیپ 16 در سلول‌‌های مورد آزمایش، از پلاسمید نوترکیب pcDNA3-E6 و نیز دو رده سلولی متفاوت MCF7 و CHO استفاده گردید. به این منظور به دنبال ترانفکشن، بیانRNA و پروتئین هدف بوسیله واکنش زنجیره‌ای پلیمراز معکوس (RT-PCR) و آزمایش لکه‌گذاری وسترن با استفاده از ژل SDS-PAGE و مونوکلونال آنتی بادی Anti-E6 ارزیابی گردید. یافته‌ها: در این مطالعه به دلیل غلظت بسیار پایین پروتئین تولیدی در سلول‌های MCF7 ، آزمایش RT-PCR مثبت و آزمایش وسترن بلاتینگ آن منفی شد، این در حالی است که در رده سلولی CHO هر دو آزمایش ذکر شده مثبت شدند بحث و نتیجه‌گیری: با توجه به نتایج بدست آمده توصیه می‌شود از سلول CHO به منظور ترانسفکشن و تولید پروتئین نوترکیب در سیستم‌هایی که تولید بالای پروتئین امکان پذیر نیست استفاده گردد </div> Background : The aim of the present study was to identify a suitable cell line for studies of recombinant protein production in eukaryotic system. After transfection, altered expression levels of RNA and its target protein were analyzed. Materials and Methods: To investigate the in vitro expression of E6 protein of human papillomavirus type 16 in cell culture, the plasmid pcDNA3-E6, and two different cell lines MCF7 and CHO were used. Following transfection, RNA expression was determined by RT- PCR and its protein target was evaluated by Western blot using SDS-PAGE gel and Anti-E6 monoclonal antibody. Results: In this study due to the low concentration of proteins in MCF7cells, RT-PCR was positive and Western blotting was negative, while RT-PCR and Western blotting were positive for CHO cell lines. Conclusion: Regarding the results, the use of CHO expression system as a tool for efficient transfection of recombinant protein production is suggested. ترانسفکشن, MCF7, CHO, RT-PCR, وسترن بلاتینگ. Transfection, MCF7, CHO, RT-PCR, Western blotting 99 106 http://yafte.lums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1280-12&slc_lang=fa&sid=1 hesam Mirshahabi حسام میرشهابی 720031947532846009822 720031947532846009822 No Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران. hooreah Soleimanjahi حوریه سلیمان جاهی soleim_h@modares.ac.ir 720031947532846009823 720031947532846009823 Yes Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran, soleim_h@modares.ac.ir گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران. zahra Meshkat زهرا مشکات 720031947532846009824 720031947532846009824 No Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran, soleim_h@modares.ac.ir گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران. elham Ahmadi الهام احمدی 720031947532846009825 720031947532846009825 No Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران.