fa همسانه سازی و بیان یک پپتید ضد میکروبی امیگانان در توتون و سیب زمینی برای مقابله با میکروب های بیماریزای انسانی میکروب شناسی میکروب شناسی پژوهشي اصیل Original Research <table align="right" border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" dir="rtl" style="width:605px;border-collapse:collapse;margin-left:6.75pt;margin-right:6.75pt;" width="605"> <tbody> <tr style="page-break-inside:avoid;height:23px;"> <td style="width: 605px; padding: 0cm 5.4pt; height: 23px; vertical-align: top; text-align: justify;"><span style="font-family:tahoma;"><span style="font-size:12.0pt;"><strong>مقدمه</strong>: </span><span style="font-size:10.0pt;">پپتیدهای ضد میکروبی یکی از اجزاء مهم سیستم ایمنی ذاتی گیاهان و جانوران محسوب می &shy;شوند. شناسایی، انتقال و بیان پپتیدهای ضد میکروبی جدید با استفاده از فن&shy;آوری&shy; های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">DNA</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> نوترکیب در گیاهان، یک راهکار مقرون به صرفه برای تولید ترکیبات ضد میکروبی با مصارف دارویی است.</span></span><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:10.0pt;"></span></span></td> </tr> <tr style="page-break-inside:avoid;height:23px;"> <td style="width: 605px; padding: 0cm 5.4pt; height: 23px; vertical-align: top; text-align: justify;"><span style="font-family:tahoma;"><strong><span style="font-size:12.0pt;">مواد و روش &shy;ها: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">در این مطالعه تجربی، یک سامانه&shy;ی ژنی حاوی یک ژن پپتید ضد میکروبی امیگانان به کمک اگروباکتریویوم تومفاشینز به دو گیاه توتون و سیب زمینی انتقال داده شد. پس از کشت بافت، حضور ژن کد کننده&shy;ی پپتید ضد میکروبی به کمک </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">PCR</span></span> <span style="font-size:10.0pt;">اثبات و تعدادی گیاه تراریخت از هر دو گیاه انتخاب شدند</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">.</span></span><span style="font-size:10.0pt;"> پروتئین کل از گیاهان تراریخت انتخابی استخراج و تاثیر آن بر برخی میکروب&shy;های مهم انسانی؛</span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Escherchia</span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">coli </span></span></em><em><span style="font-size:7.0pt;">، </span></em><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Staphylococcus epidermis </span></span></em><em><span style="font-size:7.0pt;">، </span></em><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Pseudomonas aeruginosa</span></span></em> <em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Salmonella typhi </span></span></em><em><span style="font-size:7.0pt;">، </span></em><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Staphylococcus aureus</span></span></em>، <em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Bacillus cereus</span></span></em> <span style="font-size:10.0pt;">و</span> <em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Candida albicans</span></span></em> <span style="font-size:10.0pt;">به روش انتشار در دیسک بررسی شد.</span></span></td> </tr> <tr style="page-break-inside:avoid;height:23px;"> <td style="width: 605px; padding: 0cm 5.4pt; height: 23px; vertical-align: top; text-align: justify;"><span style="font-family:tahoma;"><strong><span style="font-size:12.0pt;">یافته‌ها: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">پروتئین کل گیاهان تراریخت در مقایسه با گیاه غیر تراریخت، به طور معنی &shy;داری (01/0</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">P<</span></span><span style="font-size:10.0pt;">) مانع رشد بیشتر میکروب&shy; ها شد. تفاوت معنی&shy; داری (01/0</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">P<</span></span><span style="font-size:10.0pt;">) بین گیاهان تراریخت از نظر میزان بازدارندگی از رشد میکروب &shy;ها مشاهد شد. برخلاف باکتری&shy; های گرم منفی، حضور پپتید امیگانان در عصاره گیاهان تراریخت تاثیر معنی &shy;داری (05/0</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">P<</span></span><span style="font-size:10.0pt;">) روی باکتر&shy;های گرم مثبت نداشت.</span></span></td> </tr> <tr style="page-break-inside:avoid;height:122px;"> <td style="width: 605px; padding: 0cm 5.4pt; height: 122px; vertical-align: top; text-align: justify;"><span style="font-family:tahoma;"><strong><span style="font-size:12.0pt;">بحث و نتیجه &shy;گیری: </span></strong><span style="font-size:10.0pt;">عصاره پروتئینی گیاهان بیان کننده&shy;ی پپتید امیگانان از رشد میکروب&shy;های بیماریزای انسانی جلوگیری کرد. با خالص سازی پپتید می&shy;توان از این پپتید به عنوان یک پپتید با توانایی ضد میکروبی استفاده کرد. این روش فرصتی را فراهم می&shy;آورد تا پپتیدهای ضد میکروبی را در گیاهان برای مصرف در صنایع داروسازی تولید نمود.</span></span><br> &nbsp;</td> </tr> </tbody> </table> <div style="clear:both;"></div> <div style="text-align: justify;"><strong><em>Background</em></strong>: Antimicrobial peptides are one of the vital components of innate immunity&nbsp;in plants and animals. The identification and introduction of novel and effective peptide molecules to plants is a cost-effective way both to improve the resistance of crop plant species to pathogens, and to produce peptides for pharmaceutical applications by using recombinant DNA technology.<br> <strong><em>Material and Methods</em></strong>: An expression construct containing the omiganan (MBI-226) antimicrobial gene sequence was cloned and used for tobacco and potato <em>Agrobacterium tumefaciens-</em>mediated transformation. Following tissue culture, Polymerase chain reaction analysis (PCR) confirmed that some kanamycin resistant plants are transgenic. A number of transgenic plants, along with a non-transgenic control, were selected. Total protein was extracted from the transgenic plants, and the non-transgenic control, and was used for antimicrobial activity assay against some human pathogens, including; <em>Escherchia coli, Staphylococcus epidermis,</em> <em>Pseudomonas</em> <em>aeruginosa,</em> <em>Salmonella</em> <em>typh, Staphylococcus aureus,</em> <em>Bacillus cereus,</em> <em>Candida albicans</em> using the disc diffusion method.<br> <strong><em>Results</em>:</strong> Total protein extract from transgenic plants was significantly (P<0.05) able to inhibit the majority of bacteria growth, whereas non-transgenic total protein extract did not inhibit human pathogens growth. There was a significant difference (P<0.05) between transgenic lines with respect to omiganan peptide activity. In contrary to gram-negative bacteria, omiganan peptide did not have a significant effect (P>0.05) on human gram-positive pathogenic bacteria.<br> <strong><em>Conclusion</em></strong>: The total protein from the omiganan-expressing peptide had a strong antibacterial activity against some human bacterial pathogens. By expression and purification of the omiganan peptide, the peptide could be used as an antibiotic to destroy pathogenic bacteria. This approach could open an opportunity to produce antibacterial peptides in plants for pharmaceutical applications.</div> اگروباکتریوم تومفاشینز, پاتوژن, پپتید ضد میکروبی, پروتئین نوترکیب, توتون Antimicrobial peptides, Agrobacterium tumefaciens, Pathogen, Recombinant protein, Tobacco 14 29 http://yafte.lums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1382-2&slc_lang=fa&sid=1 Farhad Nazarian-Firouzabadi فرهاد نظریان فیروزآبادی nazarian.f@lu.ac.ir 7200319475328460018268 7200319475328460018268 Yes Genetics and Plant Breeding group, Faculty of Agricultural, Lorestan University, Khorramabad, Iran گروه ژنتیک و به نژادی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه لرستان، خرم آباد، ایران Azam Badr Hadad اعظم بدرحداد a.badrhadad@gmail.com 7200319475328460018269 7200319475328460018269 No Department of Biotechnology, Agricultural Faculty, Lorestan University, Khorramabad, Iran دانشکده کشاورزی، دانشگاه لرستان، خرم آباد، ایران Ali Sheikhian علی شیخیان alisheikhian@gmail.com 7200319475328460018270 7200319475328460018270 No Department of Immunology, School of Medicine, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran گروه علوم آزمایشگاهی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران