fa جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری‎های مولد لیپاز از پساب کارخانه فرآورده‌های گوشتی گل‌بهار خرم‌آباد میکروب شناسی میکروب شناسی پژوهشي اصیل Original Research <table align="right" class="Table" dir="rtl" style="width:596px; border-collapse:collapse; margin-left:9px; margin-right:9px" width="596"> <tbody> <tr> <td style="width: 596px; padding: 0in 7px; height: 1px; text-align: justify;" valign="top"><span style="font-family:Tahoma;"><span style="font-size:12pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span lang="AR-SA"><span style="letter-spacing:-.1pt">مقدمه:</span></span> <span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">لیپازها، به ‌دلیل توانایی زیست کاتالیزوری در محیط‌های آبی و غیرآبی یکی از مهم‌ترین کاتالیزورها برای صنایع مختلف مانند شوینده، لبنیات و نساجی به‌ شمار می‌روند</span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">.</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt"> غربال‌گری زیستگاه‌های مختلف برای شناسایی باکتری</span></span><span dir="LTR" lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">&lrm;</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">های مولد لیپاز و بهینه</span></span><span dir="LTR" lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">&lrm;</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">سازی پارامترهای فعالیت آن‌ها، تولید و استفاده مؤثر لیپازها را در صنایع مختلف تسهیل می‌کند. با توجه به اهمیت یافتن منابع جدید لیپاز، پژوهش حاضر با هدف جداسازی و شناسایی باکتری‌های مولد لیپاز و بررسی ویژگی‌های آن‌ها صورت گرفت.</span></span><span lang="AR-SA"><span style="color:black"></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span lang="AR-SA"><span style="letter-spacing:-.1pt">مواد و روش&shy; ها:</span></span> <span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">در این مطالعه، نمونه پساب کارخانه فرآورده‌های گوشتی گل‌بهار خرم‌آباد از نظر وجود سویه‌های باکتریایی مولد لیپاز غربال‌گری گردید. جدایه</span></span><span dir="LTR" lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">&lrm;</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">های تولیدکننده لیپاز بر اساس خصوصیات مورفولوژیکی، بیوشیمیایی و توالی ژن </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">&nbsp;16S rRNA</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">شناسایی شدند. پارامترهای محیط کشت مانند </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">pH</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">، دما و زمان به‌ منظور بهینه</span></span><span dir="LTR" lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">&lrm;</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">سازی فعالیت لیپازی متفاوت بودند.</span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span lang="AR-SA"><span style="letter-spacing:-.2pt">یافته &shy;ها: </span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.4pt">در این مطالعه تعداد سه ایزوله با فعالیت لیپازی بالا در اثر غربال‌گری پساب کارخانه فرآورده‌های گوشتی گل‌بهار خرم‌آباد شناسایی شدند. ایزوله‌هایی که بیشترین فعالیت لیپازی را نشان داده بودند با استفاده از بلاست توالی نوکلئوتیدی به‌دست‌آمده برای ژن </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.4pt">16S rRNA</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.4pt"> به‌عنوان</span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="letter-spacing:-.4pt">Bacillus amyloliquefaciens </span></span>&nbsp;</i><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.4pt">شناسایی شدند. همچنین بیشترین میزان فعالیت آنزیم لیپاز برای ایزوله‌های شناسایی شده در 48 ساعت ثبت شد. علاوه‌ بر‌ این، در این پژوهش مشخص شد که حداکثر فعالیت لیپازی در دمای 45 درجه سانتی‌گراد و 8 </span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.4pt">pH =</span></span><span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.4pt"> صورت می‌گیرد.</span></span><span lang="FA"><span style="color:black"></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span lang="AR-SA"><span style="letter-spacing:-.2pt">بحث و نتیجه&shy; گیری:</span></span> <span class="fontstyle01"><span style="font-weight:bold"><span style="font-style:normal"><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt"><strong>بر اساس یافته‌های این مطالعه مشخص شد که لیپاز‌های خارج سلولی ایزوله‌های باکتر</strong>ی </span></span></span></span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">B. amyloliquefaciens</span></span></i> <span lang="FA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">از نوع لیپازهای قلیایی بوده و دارای پایداری دمایی نسبتاً مناسبی هستند.</span></span> <span class="fontstyle01"><span style="font-weight:bold"><span style="font-style:normal"><span lang="AR-SA" style="font-size:10.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">با استخراج و تخلیص لیپاز خارج سلولی این ایزوله‌ها می‌توان از آن در صنایع مختلف بهره برد. همچنین با شناسایی و جداسازی ژن تولید کننده آنزیم لیپاز از ایزوله‌های مذکور می‌توان آن را در فرآیند مهندسی آنزیم وارد کرده و با ایجاد جهش‌های هدفمند، میزان فعالیت آن را به طور دلخواه تغییر داد.</span></span></span></span></span></span></span></span></span><span style="font-size:12pt"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span b="" lang="FA" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"></span></span></span></span></span></span></td> </tr> </tbody> </table> <span style="font-size:8.5pt"><span style="line-height:17pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i><span style="font-size:13.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt">Background:</span></span></i></b><b> </b><span style="font-size:12.0pt"><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Lipases are one of the most important catalysts in the detergent, dairy, and textile industries due to their biocatalytic activity in aqueous and non-aqueous media.</span></span></span> <span style="font-size:12.0pt"><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">Lipase-producing bacteria are effectively produced and used in various industries by screening their different habitats and optimizing fermentation parameters. The present study aimed to isolate and identify lipase-producing bacteria and investigate their characteristics</span></span></span> <span style="font-size:12.0pt"><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">due to the importance of finding new sources of lipase.</span></span></span><span style="font-size:12.0pt"><span style="letter-spacing:-.2pt"></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8.5pt"><span style="line-height:17pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i><span style="font-size:13.0pt">Materials and Methods:</span></i></b><span style="font-size:12.0pt"> <span style="color:black">In the present study, wastewater samples from Golbahar Meat Products Factory in Khorramabad, Iran were screened for lipase-producing bacterial strains. The lipase-producing isolates were identified based on morphological and biochemical characterization as well as the 16S rRNA gene sequence. The culture medium parameters such as pH, incubation time, and temperature were varied for optimization.</span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8.5pt"><span style="line-height:17pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i><span style="font-size:13.0pt">Results:</span></i></b><b> </b><span style="font-size:12.0pt"><span style="color:black">Three isolates with high lipase activity were identified by screening wastewater samples from Golbahar Meat Products Factory in Khorramabad. The BLAST program indicated the highest sequence similarity of identified isolates of 16S rRNA genes with <i>Bacillus amyloliquefaciens</i>. Maximum lipase activity was recorded at 48 h of incubation. Moreover, the purified lipase demonstrated maximum activity at 45 &deg;C and pH= 8.0.</span></span><span style="font-size:12.0pt"></span></span></span></span><br> <span style="font-size:8.5pt"><span style="line-height:17pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i><span style="font-size:13.0pt">Conclusion:</span></i></b><span style="font-size:12.0pt"> <span style="color:black">The results of this study revealed that the extracellular lipases of <i>Bacillus</i> <i>amyloliquefaciens</i> isolates are alkaline ones and have relatively good temperature stability which can be used in various industries. Furthermore, the gene encoding lipase enzyme of these isolates can be useful in enzyme engineering and the lipase activity can be changed as desired by site-directed mutagenesis.</span></span></span></span></span><br> &nbsp; فعالیت آنزیمی, لیپاز, Bacillus amyloliquefaciens,16S rRNA  . 16S rRNA, Bacillus amyloliquefaciens, Enzymatic activity, Lipase 15 29 http://yafte.lums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1641-2&slc_lang=fa&sid=1 Zahra Khodakaramifard زهرا خداکرمی فرد biomic89@yahoo.com 7200319475328460025657 7200319475328460025657 No Department of Food Science and Technology, Sarvestan Branch, Islamic Azad University, Sarvestan, Iran. گروه علوم و صنایع غذایی، واحد سروستان، دانشگاه آزاد اسلامی، سروستان، ایران Alireza Shirazinejad علیرضا شیرازی نژاد shirazinejad@iausarv.ac.ir 7200319475328460025658 7200319475328460025658 Yes Department of Food Science and Technology, Sarvestan Branch, Islamic Azad University, Sarvestan, Iran. گروه علوم و صنایع غذایی، واحد سروستان، دانشگاه آزاد اسلامی، سروستان، ایران Mohsen Mohammadi محسن محمدی mohamadi419@yahoo.com 7200319475328460025659 7200319475328460025659 No Department of Pharmacognosy and Pharmaceutical Biotechnology, Faculty of Pharmacy, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran. گروه فارماکوگنوزی و بیوتکنولوژی دارویی، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران Seyed Mohammad Bagher Hashemi سید محمد باقر هاشمی hashemi@fasau.ac.ir 7200319475328460025660 7200319475328460025660 No Department of Food Science and Technology, Faculty of Agriculture, Fasa University, Fasa, Iran گروه علوم و مهندسی صنایع غذایی دانشگاه فسا، فسا، ایران